Larry Daley (Ben Stiller), ki ga je sreča pustila na cedilu in čigar domiselne zamisli se niso nikoli uresničile, obupano išče službo. Od nekdaj je bil prepričan, da so mu usojene velike stvari. Vendar se mu niti ne svita, s kako gromozanskim in kosmatim izzivom se bo moral spopasti, ko godrnjaje sprejme hlapčevsko nočno službo kot varnostnik Naravoslovnega muzeja. Že prvo noč dobi v roke velikansko svetilko in priročnik, nakar ga pustijo samega v srhljivo tihem muzeju. Ampak, počakajte, kaj je bil tisti hrup? Na svoje nepopisno presenečenje in z vso možno nejevero Larry v šoku in začudenju opazuje, ko se prazgodovinske zverine in legendarne osebnosti, ki ga obkrožajo, eden za drugim čarobno prebujajo v življenje. Nastane popoln kaos. Zdaj skozi marmornate hodnike tiranozaver in Hun Atila za seboj puščata sled uničenja, levi in opice zalezujejo šibke eksponate, Larry pa ne ve, kako prevzeti nadzor nad muzejem.